Генная клеточная терапия серповидноклеточной анемии
Сочетание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) и направленной генетической модификации методом гомологичной рекомбинации (ГР) представляет многообещающий новый подход для лечения генетических заболеваний, вызванных мутацией в одном гене.
При этом возможна генетическая коррекция собственных стволовых клеток
пациента, что позволяет использовать все преимущества аутологичной
трансплантации, в частности, отпадает необходимость в иммуносупрессии. Кроме
того, в отличие от обычно применяемых методов генной терапии, исключается риск
использования вирусных векторов, а экспрессия исправленных генов поддерживается
за счет их естественных промоторов.
Однако применявшиеся до сих пор методы ГР в человеческих плюрипотентных клетках
были недостаточно эффективны. Недавно было открыто, что генноинженерные нуклеазы
цинковых пальцев (zinc finger nucleases, ZFNs) значительно повышают частоту
гомологичной рекомбинации в человеческих ИПСК, что дает возможность использовать
эту технологию для коррекции вызывающих болезни мутаций.
Американские ученые из Stanford University School of Medicine выделили линии
ИПСК от страдающих серповидноклеточной анемией пациентов и выполнили
генетическую коррекцию мутации in situ, используя три пары ZFN, полученных
стандартным методом (Oligomerized Pool Engineering, OPEN).
Генетически скорректированные клетки сохраняли полную плюрипотентность и
нормальный кариотип после удаления репрограммирующих факторов и не поддающихся
их воздействию генов.
Было также показано, что при некоторых условиях гомологичные рекомбинации
могут происходить в человеческих ИПСК на удалении до 82 пар нуклеотидов от места
разрыва, вызванного ZFN.
В целом при помощи ZFNs удалось выполнить без применения переноса генов
эффективную генетическую коррекцию в ИПСК пациентов, страдающих моногенным
генетическим заболеванием.
По мнению доктора П.И. Катуняна, главного врача московского Центра
медико-биологических технологий, полученные результаты дают важное
доказательство, что метод ZFNs может быть успешно применен в клинике для
генетической коррекции аутологичных ИПСК.
Материалы исследования представлены в статье Sebastiano V, et al. In Situ
Genetic Correction of the Sickle Cell Anemia Mutation in Human Induced
Pluripotent Stem Cells Using Engineered Zinc Finger Nucleases.
Источник: www.stemcells.ru