Данная информация предназначена для специалистов в области здравоохранения и фармацевтики. Пациенты не должны использовать эту информацию в качестве медицинских советов или рекомендаций.
Морфологические изменения в пульпе крыс при моделировании
хронического пульпита и глубокого кариеса
Егоров К.А., Смирнов А.В., Михальченко В.Ф., Снигур Г.Л., Гришин С.В.,
Черников М.В., Букатин М.В.
Кафедра патологической анатомии, кафедра терапевтической стоматологии, кафедра
биологии ВолГМУ, лаборатория морфологии и иммуногистохимии ВНЦ РАМН и АВО.
Основной причиной, способствующей воспалению в пульпе, является
кариозное поражение, которое проявляется локальным, прогрессивным разрушением
зуба [1,12]. Даже при развитии поверхностного кариеса без макроскопических
признаков убыли твердой ткани, в пульпе в области проекции кариозного очага
могут встречаться маркеры воспаления [4,9,13]. При кариесе дентина в пульпе
возможно выявление очагов воспаления иногда с развитием абсцессов [10,13]. Таким
образом, с клинической точки зрения любое кариозное поражение приводит к
воспалительным изменениям в пульпе зуба [13].
Воспалительные реакции в пульпе зуба протекают так же, как и в любых других
тканях, однако исход этого процесса может существенно отличаться ввиду
ограниченности полости зуба твердыми дентинными стенками, почти полным
отсутствием коллатерального кровообращения и способностью одонтобластов к
выработке репаративного дентина [1,3,7,10].
Воспаление в пульпе начинается с реакции сосудистого русла, заключающейся в
незначительном усилении кровотока, дилатации капилляров, повышении проницаемости
сосудистой стенки и выходе жидкости в ткани [8,10].
В начале клеточной фазы воспаления преобладает нейтрофильная инфильтрация.
Позже в очаге воспаления появляются лимфоциты, макрофаги и плазматические
клетки. Последние доминируют в тканевой фазе при хроническом воспалении пульпы.
Т и В-лимфоциты, а так же макрофаги помимо обеспечения реакции гуморального и
клеточного иммунитета оказывают и разрушающее действие на клетки пульпы либо в
результате прямого цитотоксического действия, либо опосредованно за счет
выделения цитокинов, коллагеназы и других веществ. Таким образом, иммунный ответ
приводит к еще большему повреждению тканей пульпы [8,10]. Это может проявиться в
дальнейшем усилением хемотаксической активности с привлечением новых
нейтрофилов. В этом случае возможно наложение острой воспалительной реакции на
хронический воспалительный процесс [9,12,13]. Хроническое воспаление может
развиться и без предшествующего острого воспаления, как реакция на внедрение
бактерий при кариозном процессе и микроподтекании между реставрацией и зубными
тканями [9].
Таким образом, воспаление в тканях пульпы является динамическим процессом.
При этом одновременно в разных отделах пульпы могут наблюдаться признаки
различных стадий воспалительной реакции. Наиболее типичной является
гистологическая картина, при которой в области действия патологического фактора
отмечается тканевый некроз, в окружающих областях – хронические изменения. И
одновременно с этим в области корневой пульпы ткани могут быть не изменены
[1,4,7].
Цель работы
Выявить морфологические особенности протекания воспалительного процесса в
пульпе зуба в различные сроки экспериментально моделируемого глубокого кариеса и
хронического пульпита. Методика исследования. Исследования были выполнены на 15
половозрелых нелинейных белых крысах-самцах массой 350-420 г. Зубы животных
интактной группы (5 крыс, 20 зубов) составляли контроль.
Животные содержались в условиях вивария, согласно правилам лабораторной
практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ Р 50258-92, ГОСТ 3
51000.3-96 и 51000.4-96) с соблюдением Международных рекомендаций Европейской
конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных
исследованиях (1997). У животных экспериментальной группы (10 крыс, 80 зубов)
моделировали глубокий кариес и хронический пульпит. Под общей анестезией
раствором золетила 5 мг/кг и рометара 2% 2 мг/кг [5] алмазным шаровидным бором с
диаметром рабочей части 1,5 мм наносили повреждения на жевательной поверхности
моляров. Для моделирования глубокого кариеса (экспериментальные группы 1С, 2С,
3С, 4С, 5С) на 4 молярах верхней и нижней челюсти слева повреждения были сделаны
на глубину 1,5 мм. Для моделирования хронического пульпита (экспериментальные
группы 1Р, 2Р, 3Р, 4Р, 5Р) на 4 молярах верхней и нижней челюсти справа были
нанесены повреждения бором такой же глубины и точечно файлом № 20 вскрыта
полость пульпы. Крысы контрольной группы были только анестезированы аналогично
опытной группе. Все животные содержались в стандартных условиях вивария
при свободном доступе к воде и пище. Через 2 недели крысы 1С и 1Р группы, 4
недели - 2С и 2Р группы, 6 недель - 3С и 3Р группы, 8 недель - 4С и 4Р группы и
10 недель - 5С и 5Р группы подвергались эвтаназии путем декапитации в
соответствии с Приложением № 4 к Правилам проведения работ с использованием
экспериментальных животных (Приказ № 755 от 12.08.1977 г.).
Рис. 1. Гистологическое строение пульпо-дентинного
комплекса у контрольных животных. D - дентин, PD - предентин, OB - одонтобласты,
CF (cell free zone) - бесклеточная зона, CR (cell rich zone) - зона богатая
клетками, Pl - сплетение Рашкова. Окраска гемотоксилин-эозин, объектив Х 40.
Зубы фиксировали в течение 24 часов в 10 % растворе нейтрального
забуференного формалина (pH 7,4), декальцинировали в растворе трилона В,
обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой гистологической методике.
Изготавливались срезы толщиной 3-5 мкм, которые окрашивали гематоксилином и
эозином по стандартной методике [6].
Гистологические препараты изучали с использованием микроскопа «Micros»
(Австрия), фотографировали цифровой камерой (Canon, Япония). При исследовании
оценивали наличие морфологических признаков воспалительной реакции в пульпе
зуба.
Рис. 2. Экспериментально полученный хронический пульпит.
Участок пульпы с лимфоидной инфильтрацией и полнокровием кровеносных
сосудов. Окраска гемотоксилин - эозин, объектив Х 40.
Результаты исследования и их обсуждение
1. При морфологическом исследовании пульпы зубов 1С группы отмечалось
преобладание очаговых кровоизлияний в строму и умеренно выраженного полнокровия
кровеносных сосудов, а так же наблюдались умеренно выраженный фиброз стромы и
наличие в строме единичных лимфоцитов и гистиоцитов. В единичных случаях
отмечались участки образования репаративного дентина, дистрофические изменения в
одонтобластах и периваскулярное отложение солей кальция. Таким образом, в пульпе
зубов 1С группы преобладают дистрофические изменения, признаки острого серозного
очагового пульпита и слабовыраженные признаки хронического пульпита.
В пульпе зубов 1Р группы отмечались умеренно выраженные явления отека стромы,
полнокровие кровеносных сосудов и очаговые кровоизлияния в строму, а так же
умеренное очаговое разрастание волокнистой соединительной ткани, отложение солей
кальция и диффузная инфильтрация стромы с незначительным количеством лимфоцитов
и макрофагов. Данные изменения говорят об остром серозном пульпите и умеренно
выраженных признаках хронического пульпита.
2. Морфологическое исследование пульпы зубов 2С группы выявило выраженный
отек стромы, дистрофию и некроз одонтобластов, умеренное полнокровие кровеносных
сосудов, в отдельных случаях очаговую полиморфноядерную или лимфоидную
инфильтрацию с наличием единичных нейтрофильных лимфоцитов. Таким образом, в
пульпе зубов данной группы развиваются дистрофические изменения, присутствуют
признаки острого очагового серозного (в одном случае гнойного) пульпита и слабо
выраженные признаки хронического пульпита.
В пульпе зубов 2Р группы выявлен незначительный неравномерный отек стромы,
умеренное полнокровие кровеносных сосудов, а так же умеренное диффузное
разрастание волокнистой соединительной ткани. В единичных случаях отмечалась
выраженная очаговая инфильтрация стромы сегментоядерными нейтрофильными
гранулоцитами (формирование пульпарных микроабсцессов). Данные изменения говорят
об остром серозном (в одном случае гнойном) пульпите и умеренно выраженных
признаках хронического пульпита.
3. При морфологическом исследовании пульпы зубов 3С группы обнаружены
умеренно выраженный фиброз стромы, умеренно выраженное полнокровие кровеносных
сосудов, в единичных случаях очаговая периваскулярная кальцификация стромы,
очаговая лимфоидная инфильтрация и дистрофия одонтобластов. Таким образом,
наблюдаются дистрофические изменения и слабо выраженные признаки хронического
пульпита.
В пульпе зубов 3Р группы отмечалось умеренное полнокровие кровеносных сосудов
и умеренное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани. Наряду с
этим наблюдалась очаговая инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами, а так
же кальцификация стромы. Следовательно, обнаруживаются очаговые дистрофические
изменения в пульпе на фоне умеренно выраженных признаков диффузного
продуктивного (хронического) пульпита.
4. При морфологическом исследовании пульпы зубов 4С и 5С групп выявлены
умеренный фиброз пульпы, слабо выраженное полнокровие кровеносных сосудов, в
отдельных случаях слабо выраженная лимфоидная инфильтрация и очаговая
кальцификация стромы. Таким образом, выявляются дистрофические изменения и
умеренно выраженные признаки хронического пульпита.
5. В пульпе зубов 4Р и 5Р групп отмечалось отложение солей кальция, более
выраженное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани и очаговая
инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами, что свидетельствует о сохранении
дистрофических изменений в пульпе и умеренно выраженных признаках продуктивного
воспаления (хронического пульпита).
Полученные данные сопоставимы с описанием морфологической картины кариеса и
пульпита в научной литературе [1,2,3,4,7,8,9,11,12,13], что говорит об
адекватности предложенных моделей. Во всех группах зубов с кариесом отмечаются
дистрофические изменения, а так же наличие воспаления в пульпе зуба,
имеющее характер острого процесса, переходящего в хронический. При моделировании
хронического пульпита изменение в пульпе зуба носят более выраженный характер, и
быстрее достигается хронизация воспалительного процесса. Исследование
морфологических изменений в пульпе зуба выявило ряд особенностей протекания
воспалительного процесса в пульпе зубов крыс.
Рис. 3. Экспериментально полученный хронический пульпит.
Участок пульпы с выраженным интерстициальным отеком. Окраска гемотоксилин -
эозин, объектив Х 40.
Заключение
Результаты исследования свидетельствуют о том, что в пульпе зубов с моделью
кариеса на 2 и 4 неделе эксперимента отмечается преобладание дистрофических
изменений и острого воспалительного процесса, а так же слабовыраженные признаки
хронического пульпита. На 6 неделе обнаружены дистрофические изменения и
слабовыраженный хронический пульпит. На 8 и 10 неделе признаки хронического
пульпита становятся умеренно выраженными.
При моделировании хронического пульпита на 2 и 4 неделе эксперимента
обнаруживаются морфологические признаки экссудативного серозного (в одном случае
гнойного) очагового воспаления, а так же умеренные признаки хронического
пульпита. На 6, 8 и 10 неделе - умеренно выраженные признаки продуктивного
(хронического) пульпита и очаговое дистрофическое обызвествление.
Литература
1. Боровский Е.В. // Терапевтическая стоматология. – М.: «Медицинское
информационное агентство». - 2004. - С. 375-377.
2. Данилевский Н.Ф., Сидельникова Л.Ф., Рахний Ж.И. // Пульпит. - Киев.:
Издательство «Здоровье». - 2003. – С. 18-24.
3. Коэн С., Бернс Р.// Эндодонтия. - Перевод с английского Шульги О.А.,
Куадже А.Б.. –С.-Петербург: НПО «Мир и семья», ООО «Интерлайн». - 2000.- С.
312-320.
4. Петрикас А.Ж. // Пульпэктомия. – 2-е изд. – М.: АльфаПресс. 2006. - Стр.
26-28, 35.
5. Пламб Д.К.// Фармокологические препараты в ветеринарной медицине. -
Перевод с англ. Осипова Е.И.- М.: Аквариум ЛТД. - 2002. - Стр. 737-739, 774-776.
6. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. // Микроскопическая техника. - М.: Медицина. -
1996. – 544с.
7. Bergenholtz G., Horsted-Bindslev P., Reit C.// Textbook of endontology. -
Blackwell Publishing Ltd. - 2010. - P. 25-278.
8. Cawson R.A., Odell E.W. // Oral Pathology. - Churchill Livingstone. -
1995.- Р. 7-9.
9. Hargreaves K.M., Goodis H.E. // Seltzer and Bender’s dental pulp. -
Quintessence Puplishing Co, Inc. 2002. - P. 227-235.
10. Ingle J.I., Bakland L.K. // Endodontics. – William & Wilkians. - 1994. –
Р. 350-357.
11. Nevill B. W., Allen C. M., Bouquot J.E. // Oral and Maxillofacial
Pathology. – 2002. - Р. 107-110.
12. Seltzer S., Bender I. // The dental pulp. – Philadelphia. - J.B.
Lippincott Company. - 1987. - P. 11, 252-260.
13. Tronstad L. // Clinical Endodontics. - Thieme Verlagsgruppe. – 2002. – P.
20-29.
www.volgostom.ru