Эффективный и безопасный метод репрограммирования клеток-предшественников для использования в клеточной терапии
Несмотря на успехи последних лет в области репрограммирования соматических клеток и индукции их плюрипотентности, остается неясным, какие клетки лучше использовать и насколько примитивный статус им возвращать, если предполагается использовать их в клеточной терапии.
Требуется репрограммирование к плюрипотентности коммитированных клеток, уже
начавших специализацию, но это может увеличивать риск неоплазии и появления
нежелательных типов клеток. Лучше всего для трансплантации подошли бы
клетки-предшественники из того органа, который нуждается в клеточной терапии.
Как правило, этим клеткам недостает лишь одного из принципиально необходимых
качеств – способности к продолжительному самообновлению.
Группа корейских ученых из сеульского Medical Research Institute, Chung-Ang
University College of Medicine поставила целью своей работы придание
клеткам-предшественникам способности к регулируемому самообновлению
исключительно in vitro с последующей дифференцировкой в нужный тип клеток in
vivo. При этом отпадает необходимость в возвращении этим предшественникам
плюрипотентности.
Ученые получили «индуцированные клетки-предшественники с регулируемым
самообновлением» ("induced conditional self-renewing progenitor (ICSP) cells")
из человеческих клеток центральной нервной системы. В экспериментах проверяли их
эффективность, безопасность, приживаемость после трансплантации и
терапевтическую применимость. Для управления пролиферацией клеток в них был
встроен ген v-myc, строго регулируемый тетрациклиновой (Tet)-системой включения
генной экспрессии. Добавление Tet в культуральную среду активирует транскрипцию
и трансляцию гена myc, что дает возможность быстрого размножения клеток ex vivo,
в результате чего получается однородная клональная популяция кариотипически
нормальных человеческих ЦНС-предшественников. При отсутствии Tet экспрессия myc
также отсутствует и самообновление клеток полностью инактивировано (что
исключает возможность опухолевого роста). После трансплантации
клеток-предшественников крысам их пролиферация прекращается и они
дифференцируются в электрофизиологически активные нейроны и другие типы клеток
ЦНС. Клетки трансплантировали крысам как во время эмбрионального развития, так и
взрослым после повреждения ЦНС – в этом случае происходило восстановление
нарушенных функций. Не наблюдалось никаких признаков неоплазии, избыточного
роста, деформации, появления клеток не-нервных типов, фенотипической или
генотипической нестабильности. Не возникало также необходимости в
иммуносупрессии.
Таким образом, предложенная стратегия получения большого количества пригодных
для трансплантации клеток-предшественников доказала свою эффективность,
безопасность и практическую применимость.
По мнению доктора П.И. Катуняна, главного врача московского Центра
медико-биологических технологий, использование этого метода может значительно
улучшить результаты клеточной терапии различных заболеваний.
Источник: www.stemcells.ru